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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
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  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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轮状病毒结构蛋白VP4在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

【期刊年份】2019年第02期
【作者姓名】靳洋洋  陈贝妮  李司
【作者单位】浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所,浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

摘要  轮状病毒(rotavirus,RV)是引起全球婴幼儿及幼畜非细菌性胃肠炎的主要病原体之一,VP4蛋白是轮状病毒的主要中和抗原。利用载体RD-BmBacmid与重组载体pBacPAK8-VP4 共转染家蚕细胞BmN获得重组家蚕杆状病毒BmNPV-VP4,并用该病毒感染BmN细胞及家蚕5龄幼虫,从而在BmN细胞及家蚕中表达TB-Chen株轮状病毒的VP4蛋白。Western blotting检测到BmN细胞及家蚕幼虫血淋巴中均出现88 kD的特异性条带,证明VP4蛋白在BmN细胞和家蚕中获得了表达。ELISA检测结果显示,VP4蛋白在BmN细胞和家蚕幼虫血淋巴中的表达分别在感染后4 d和6 d达到最高水平,每个细胞和每mL血淋巴中的表达量分别为4.28 pg和1.61 μg。研究结果为轮状病毒口服疫苗的研制奠定了基础。

关键词  轮状病毒; VP4蛋白; RD-BmBacmid载体; 家蚕杆状病毒表达系统