重组鸡γ-干扰素在家蚕中的表达及抗病毒活性
摘要 鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)是一类具有免疫调节及抗病毒活性的细胞因子。利用家蚕杆状病毒表达系统表达具有高生物活性的鸡γ-干扰素。首先,对ChIFN-γ基因序列进行优化与合成,再将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393多克隆位点中,与缺少orf1629基因的家蚕杆状病毒reBmBac共转染BmN细胞获得重组病毒reBm-ChIFN-γ。将reBm-ChIFN-γ注射感染家蚕5龄幼虫,检测感染后96~120 h之间发病蚕体的血淋巴。PCR扩增结果显示成功构建了重组杆状病毒reBm-ChIFN-γ,Western blot检测重组杆状病毒在家蚕体内表达了目的干扰素,微量细胞病变抑制法检测表达产物具有明显的抗病毒活性,效价约为(3.24±0.32)×106 U/mL。试验结果表明,利用家蚕杆状病毒表达系统成功地表达出具有较高抗病毒活性的鸡γ-干扰素,为鸡γ-干扰素相关生物制剂的研发奠定了基础。