摘要  剪接因子Prp5是一种三磷酸腺苷（ATP）水解酶/RNA解旋酶，在内含子的识别和预剪接体的组装过程中具有重要的调控作用。分别克隆了酵母（Saccharomyces cerevisiae）与人（Homo sapiens）Prp5蛋白的核心编码序列ScPrp5-M和hPrp5-M，然后在序列上游分别添加8×His标签序列，再与转基因质粒pBac-Seri1-IE1dsRed（含seri1基因启动子和信号肽序列）进行重组，得到pBac-ScPrp5-M和pBac-hPrp5-M转基因质粒。利用家蚕转基因技术将转基因质粒分别注射到蚕卵中，通过串联红色荧光标记筛选阳性转基因家蚕，在基因组水平检测到有ScPrp5-M和hPrp5-M插入的家蚕个体，进一步的RNA和蛋白质检测也证明2种外源蛋白在家蚕中部丝腺中特异性表达，并且在5龄第4天和第5天的表达量较高。此外，在家蚕中部丝腺表达的2种重组蛋白均能随丝蛋白分泌到体外存在于茧层中，经裂解和纯化后，每1 g鲜茧茧层可分别获得6.25 μg重组ScPrp5-M蛋白和12.5 μg重组hPrp5-M蛋白。利用家蚕丝腺生物反应器表达外源Prp5蛋白，为进一步研究Prp5蛋白的功能奠定了一定的实验基础。