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国内刊号:CN 32-1115/S
国际刊号:ISSN 0257-4799
主管部门:中国科学技术协会
主办单位:中国蚕学会
             中国农业科学院蚕业研究所
主 编:郭锡杰
编辑部主任:魏幼平
刊社地址:江苏省镇江市四摆渡
             中国农业科学院蚕业研究所
邮政编码:212018
电 话:0511-85616835
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信 箱:canyekexue@126.com
 
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家蚕感染BmCPV相关未知功能蛋白LOC101742613的基因克隆及表达特征分析
【出版年份】
2019年第1期
【资助项目】
国家自然科学基金项目(No.31402141),江苏省自然科学基金项目(No.BK20140508,BK20161365)
【作者姓名】
汪羚 杨娟 李斌 尚梦珂 高坤 侯成香 唐旭东 郭锡杰
【作者单位】
1江苏科技大学生物技术学院,江苏 镇江212018;2中国农业科学院蚕业研究所,江苏 镇江212018

摘要  在感染家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrovirus,BmCPV)的家蚕中肠组织中发现一个表达量明显下调的未知蛋白LOC101742613,与棉铃虫(Helicoverpa armigera)的未知蛋白LOC110378285 的序列一致性为51%。利用PCR技术克隆获得了编码该蛋白质的cDNA,其序列全长为1 114 bp,最大开放阅读框(ORF)为993 bp,编码的蛋白质由330个氨基酸残基组成,预测蛋白质分子质量为36.6 kD,等电点为4.31。实时荧光定量PCR分析发现目的基因主要在家蚕的脂肪体、精巢、卵巢和头部组织中表达,且家蚕中肠感染BmCPV48 h72 hmRNA的表达量显著下调,分别为对照组的7.3%2.1%。通过构建重组表达载体pET28a/BGIBMGA014203对去掉信号肽的目的蛋白进行原核表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析发现重组蛋白主要在包涵体中,分子质量约为37 kD。研究结果为进一步阐明目的基因的生物学功能奠定了基础。

关键词   家蚕; 质型多角体病毒; 实时荧光定量PCR 原核表达

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