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国内刊号:CN 32-1115/S
国际刊号:ISSN 0257-4799
主管部门:中国科学技术协会
主办单位:中国蚕学会
             中国农业科学院蚕业研究所
主 编:郭锡杰
编辑部主任:魏幼平
刊社地址:江苏省镇江市四摆渡
             中国农业科学院蚕业研究所
邮政编码:212018
电 话:0511-85616835
传 真:0511-85616835
信 箱:canyekexue@126.com
 
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家蚕常用内参蛋白多克隆抗体的制备及应用比较分析
【出版年份】
2018年第6期
【资助项目】
河南省教育厅高等学校重点科研项目(No.17A180031),河南省高等学校青年骨干教师项目(No.2016GGJS-127),南阳师范学院STP项目(No.STP2017024)
【作者姓名】
王远卓 魏博帆 陈莹 杨娟娟 乔惠丽
【作者单位】
南阳师范学院农业工程学院,河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室

摘要  内参基因是一种在所有组织和细胞中都表达的管家基因,常被用作基因和蛋白质功能研究中的参照。目前市场上商品化的内参抗体在家蚕中检测不稳定,制备高效、特异的可用于家蚕研究的内参抗体显得十分必要。对家蚕中常用的内参基因actintubulin进行克隆,构建其原核表达载体;通过原核表达和纯化,获得了纯度较高的融合蛋白;免疫新西兰大白兔后,成功制备了二者的多克隆抗体;酶联免疫吸附检测Actin抗体和Tubulin抗体的效价分别为11 000116 000Western blot结果表明,制备的家蚕内参抗体不仅能特异结合家蚕蛋白,同时可有效检测其他昆虫及哺乳动物中的相应蛋白,且抗体制备简单,成本较低,从而增加了内参抗体的多样性和选择性,为后续家蚕蛋白的功能研究奠定了基础。

关键词  家蚕; 肌动蛋白; 微管蛋白; 甘油醛-3-磷酸脱氢酶; 抗体

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